了解對(duì)新冠病毒（SARS-CoV-2）的免疫記憶力對(duì)于改進(jìn)診斷和疫苗以及評(píng)估未來(lái)可能的新冠大流行的進(jìn)程至關(guān)重要。我們分析了188例新冠患者254份血液樣本中SARS-CoV-2循環(huán)免疫記憶的多個(gè)亞群，當(dāng)然，這254份樣本中包涵了43份長(zhǎng)達(dá)6個(gè)月的感染新冠的病人血液樣本。刺突蛋白（Spike蛋白）的免疫球蛋白在6個(gè)多月內(nèi)相對(duì)穩(wěn)定。特異性刺突記憶B細(xì)胞在新冠癥狀發(fā)作后的第6個(gè)月比比起病時(shí)的第1個(gè)月時(shí)更加豐富。新冠特異性CD4+T細(xì)胞、CD8+T細(xì)胞在體內(nèi)減少的半衰期（有半數(shù)細(xì)胞發(fā)生衰變時(shí)所需要的時(shí)間）為3-5個(gè)月：口語(yǔ)的講，即是，在新冠感染后的8個(gè)月內(nèi)，你有免疫抗擊能力！
介紹
新冠是由新型嚴(yán)重急性呼吸綜合征冠狀病毒2型（SARS-CoV-2）引起的一種嚴(yán)重疾病，已導(dǎo)致全球廣泛的發(fā)病率和死亡率。人類產(chǎn)生SARS-CoV-2特異性抗體、CD4+T細(xì)胞和CD8+T細(xì)胞以響應(yīng)SARS-CoV-2感染。對(duì)急性和恢復(fù)期新冠患者的研究發(fā)現(xiàn)，T細(xì)胞反應(yīng)與疾病減少相關(guān)，這表明SARS-CoV-2特異性CD4+T細(xì)胞和CD8+T細(xì)胞反應(yīng)可能對(duì)控制和解決原發(fā)性SARS-CoV-2感染很重要。無(wú)效的先天免疫與原發(fā)性SARS-CoV-2感染缺乏控制以及致命性新冠的高風(fēng)險(xiǎn)密切相關(guān)，并伴有先天性細(xì)胞免疫病理學(xué)。中和抗體通常與新冠疾病嚴(yán)重程度降低無(wú)關(guān)，這也適用于由MERS-CoV引起的中東呼吸綜合征（MERS）。相反，中和抗體與非人類靈長(zhǎng)類動(dòng)物對(duì)SARS-CoV-2或SARS-CoV繼發(fā)感染的保護(hù)性免疫相關(guān)。在感染之前被動(dòng)轉(zhuǎn)移中和抗體有效地限制了動(dòng)物模型中的上呼吸道感染、下呼吸道（肺部）感染和癥狀性疾病。在人類感染開(kāi)始后提供的中和抗體的被動(dòng)轉(zhuǎn)移對(duì)新冠的影響更為有限，這與T細(xì)胞在控制和清除SARS-CoV-2持續(xù)感染中的重要作用一致。因此，綜合研究抗體、記憶B細(xì)胞、CD4+T細(xì)胞和CD8+T細(xì)胞對(duì)SARS-CoV-2的記憶，對(duì)于理解SARS-CoV 2原發(fā)感染產(chǎn)生的抗新冠保護(hù)性免疫的持久性可能很重要。
雖然對(duì)病毒的免疫消毒只能通過(guò)高滴度中和抗體來(lái)實(shí)現(xiàn)，但對(duì)臨床疾病或死亡的成功保護(hù)可以通過(guò)其他幾種免疫記憶場(chǎng)景來(lái)實(shí)現(xiàn)。免疫保護(hù)的可能機(jī)制可以根據(jù)免疫記憶反應(yīng)和感染的相對(duì)動(dòng)力學(xué)而變化。例如，即使在沒(méi)有循環(huán)抗體的情況下，乙肝病毒（HBV）感染后的臨床肝炎也可以通過(guò)疫苗引發(fā)的免疫記憶來(lái)預(yù)防，因?yàn)镠BV疾病的病程相對(duì)緩慢。人類嚴(yán)重新冠感染相對(duì)較慢的病程表明，對(duì)癥狀性或嚴(yán)重繼發(fā)性新冠感染的保護(hù)性免疫可能涉及循環(huán)記憶T細(xì)胞和記憶B細(xì)胞。
來(lái)自原發(fā)性感染或接種針免疫的免疫記憶是后續(xù)感染的保護(hù)性免疫來(lái)源。因此，新冠疫苗的開(kāi)發(fā)依賴于免疫記憶。盡管進(jìn)行了深入的研究，但基于初始效應(yīng)器階段，人類對(duì)感染或免疫的免疫記憶的動(dòng)力學(xué)、持續(xù)時(shí)間和進(jìn)化通常是不可預(yù)測(cè)的，并且在感染解決后的短時(shí)間點(diǎn)的免疫反應(yīng)并不能很好地預(yù)測(cè)長(zhǎng)期記憶。因此，通常需要在六個(gè)月或更長(zhǎng)的時(shí)間間隔內(nèi)評(píng)估反應(yīng)，以確定免疫記憶的持久性。
徹底了解SARS-CoV-2的免疫記憶需要評(píng)估其各種成分，包括B細(xì)胞、CD8+T細(xì)胞和CD4+T細(xì)胞，因?yàn)檫@些不同的細(xì)胞類型可能具有彼此相對(duì)獨(dú)立的免疫記憶動(dòng)力學(xué)。了解SARS-CoV-2免疫記憶的復(fù)雜性是深入了解SARS-CoV-2再感染和繼發(fā)性新冠感染保護(hù)性免疫耐受性可能性的關(guān)鍵。在當(dāng)前的研究中，我們對(duì)188例恢復(fù)期新冠病例進(jìn)行了橫斷面研究，評(píng)估了適應(yīng)性免疫所有三個(gè)分支（CD4+T細(xì)胞、CD8+T細(xì)胞、體液免疫）的免疫記憶，研究持續(xù)至感染后8個(gè)月。這一發(fā)現(xiàn)對(duì)繼發(fā)性新冠的免疫力以及未來(lái)大流行的潛在進(jìn)程具有指導(dǎo)意義。
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新冠感染隊(duì)列
本研究招募了188名新冠感染患者。受試者（80名男性，108名女性）代表一系列無(wú)癥狀、輕度、中度和重度新冠感染病例（表1），從美國(guó)多個(gè)地點(diǎn)招募。大多數(shù)受試者來(lái)自加利福尼亞或紐約。大多數(shù)受試者患有“輕度”新冠感染，不需要住院治療。93%的受試者從未因新冠感染住院；7%的受試者住院，其中一些人需要重癥監(jiān)護(hù)室（ICU）護(hù)理（表1）。該病例嚴(yán)重程度分布與美國(guó)新冠感染病例中癥狀性疾病嚴(yán)重程度的總體分布一致。由于研究招募設(shè)計(jì)的性質(zhì)，該研究主要包括癥狀性疾病病例（97%，表1）。受試者年齡從19歲到81歲（表1）。大多數(shù)受試者在癥狀發(fā)作后6天（PSO）和240天（PSU）之間的單個(gè)時(shí)間點(diǎn)提供血液樣本（表1），其中43個(gè)樣本的PSO≥6個(gè)月（178天或更長(zhǎng)）。此外，研究中的51名受試者在幾個(gè)月的時(shí)間內(nèi)（2-4個(gè)時(shí)間點(diǎn)；表1）提供了縱向血液樣本，允許對(duì)隊(duì)列的一個(gè)子集中的免疫記憶進(jìn)行縱向評(píng)估。
SARS-CoV-2循環(huán)抗體隨時(shí)間變化
絕大多數(shù)SARS-CoV-2感染者血清轉(zhuǎn)換，至少持續(xù)數(shù)月。在大型研究中，血清轉(zhuǎn)化率為91-99%。圖1中循環(huán)抗體滴度的耐久性評(píng)估基于≥20天的PSO數(shù)據(jù)，最佳擬合曲線擬合模型的圖以藍(lán)色顯示（見(jiàn)方法）。測(cè)定了該隊(duì)列所有受試者血漿中SARS-CoV-2刺突免疫球蛋白G（IgG）終點(diǎn)ELISA效價(jià)（圖1，A和B）。還測(cè)量了刺突受體結(jié)合域（RBD）IgG（圖1，C和D），因?yàn)镽BD是針對(duì)SARS-CoV-2的大多數(shù)中和抗體的目標(biāo)。在所有受試者中測(cè)量SARS-CoV-2假病毒（PSV）中和抗體滴度（圖1，E和F）。還測(cè)量了所有受試者的核衣殼（N）IgG終點(diǎn)ELISA效價(jià)（圖1，G和H），因?yàn)楹艘職な巧逃肧ARS-CoV-2血清學(xué)試劑盒中的常見(jiàn)抗原。
通過(guò)橫斷面分析評(píng)估所有新冠感染受試者時(shí)，SARS-CoV-2 Spike IgG滴度在20-240天PSO時(shí)相對(duì)穩(wěn)定（半衰期t1/2=140天，圖1A）。受試者之間的峰值IgG滴度是異質(zhì)的（范圍5至73071；中位數(shù)575）。這給出了刺突IgG t1/2的寬置信區(qū)間（95%置信區(qū)間：89至325天）。雖然抗體反應(yīng)可能具有更復(fù)雜的潛在衰變動(dòng)力學(xué)，但最佳擬合曲線是連續(xù)衰變，可能與個(gè)體之間的異質(zhì)性有關(guān)。SARS-CoV-2核衣殼IgG動(dòng)力學(xué)在8個(gè)月內(nèi)與Spike IgG相似（t1/2 68天，95%置信區(qū)間：50-106天，圖1G）。作為一種補(bǔ)充方法，使用在兩個(gè)或多個(gè)時(shí)間點(diǎn)捐贈(zèng)的受試者子集的配對(duì)樣本，計(jì)算的Spike IgG滴度平均值t1/2為103天（95%CI：66-235天，圖1B），核衣殼IgG滴度平均t1/2為68天（95%CI：55-90天，圖1H）。PSO 1個(gè)月（20-50天）時(shí)，Spike IgG血清陽(yáng)性的受試者比例為98%（54/55）。PSO 6至8個(gè)月（≥178天）時(shí)，Spike IgG血清陽(yáng)性的受試者比例為90%（36/40）。
對(duì)20-240天PSO SARS-CoV-2 RBD IgG滴度的橫斷面分析得出了83天的估計(jì)t1/2（95%置信區(qū)間：62-126天，圖1C）。作為一種補(bǔ)充方法，我們?cè)俅问褂门鋵?duì)樣本，其平均t1/2為69天（95%置信區(qū)間：58-87天，圖1D）。6至8個(gè)月PSO時(shí)RBD IgG血清陽(yáng)性的受試者比例為88%（35/40）。因此，RBD IgG滴度的維持與Spike IgG的維持基本一致。整個(gè)隊(duì)列中SARS-CoV-2 PSV中和滴度與SARS-CoV-2 RBD IgG ELISA結(jié)合滴度的結(jié)果基本一致（圖1，E和F）。單相衰變模型是最佳擬合（P=0.015，F(xiàn)檢驗(yàn)。初始衰變t1/2 27天，隨后是延長(zhǎng)的平臺(tái)期。圖1E），而連續(xù)衰變擬合給出的估計(jì)t1/2為114天（圖1E，黑線）。PSV中和滴度的成對(duì)時(shí)間點(diǎn)分析給出了90天的估計(jì)t1/2（95%置信區(qū)間：70-125天，圖1F）。6至8個(gè)月PSO時(shí)SARS-CoV-2中和抗體（滴度≥20）血清陽(yáng)性的受試者比例為90%（36/40）。值得注意的是，即使是低水平的循環(huán)中和抗體滴度（≥1:20）也與非人靈長(zhǎng)類動(dòng)物對(duì)新冠感染的實(shí)質(zhì)性保護(hù)有關(guān)。因此，適度水平的循環(huán)SARS-CoV-2中和抗體對(duì)人類具有生物學(xué)意義。
還評(píng)估了SARS-CoV-2刺突IgA（圖1，I和J）和RBD IgA（表1，K和L）滴度。Spike IgA滴度的成對(duì)時(shí)間點(diǎn)分析得出210天的估計(jì)t1/2（95%CI 126-703天，圖1J）。Spike IgA的橫截面分析符合具有延長(zhǎng)平臺(tái)期的短單相衰減模型（初始t1/2為14天，圖1I）。循環(huán)RBD IgA的初始t1/2估計(jì)為27天，在大多數(shù)新冠感染病例中衰減約90天，與未感染對(duì)照組的水平無(wú)明顯區(qū)別（圖1K）。通過(guò)配對(duì)樣本分析，在一些受試者中產(chǎn)生了持久的RBD IgA，但通常接近靈敏度極限（圖1L）。
SARS-CoV-2記憶B細(xì)胞
為了鑒定SARS-CoV-2特異性記憶B細(xì)胞，使用熒光標(biāo)記的多聚探針檢測(cè)對(duì)Spike、RBD和核衣殼特異的B細(xì)胞（圖2A和圖S1）。抗原結(jié)合記憶B細(xì)胞（定義為IgD-和/或CD27+）根據(jù)表面Ig同種型進(jìn)一步區(qū)分：IgM、IgG或IgA（圖2B和圖S1）。
對(duì)新冠感染受試者的橫斷面分析顯示，SARS-CoV-2 Spike-specific memory B cells的頻率在最初~120天的PSO期間增加，然后趨于平穩(wěn)（最佳擬合曲線的偽一階模型，R=0.38）。Akaike信息準(zhǔn)則比二階多項(xiàng)式模型更適合。圖2C和圖S2A）。在來(lái)自36個(gè)縱向追蹤供體中的24個(gè)配對(duì)樣本中，尖峰特異性記憶B細(xì)胞頻率從第一時(shí)間點(diǎn)（36-163天）增加到第二時(shí)間點(diǎn)（111-240天）（圖2D）。SARS-CoV-2未暴露受試者的刺突特異性記憶B細(xì)胞很少（中位數(shù)0.0078%。圖2，A和C）。
RBD特異性記憶B細(xì)胞表現(xiàn)出類似于Spike特異性記憶B細(xì)胞的動(dòng)力學(xué)。如預(yù)期的那樣，在SARS-CoV-2未暴露的受試者中檢測(cè)不到RBD特異性記憶B細(xì)胞（圖2E和圖S2C）。RBD特異性記憶B細(xì)胞早在PSO的16天就出現(xiàn)了，并且在隨后的4-5個(gè)月內(nèi)頻率穩(wěn)步增加（圖2E和圖S2，B和C）。36名縱向追蹤的個(gè)體中有29人在較晚的時(shí)間點(diǎn)具有更高的RBD特異性記憶B細(xì)胞頻率（圖2F），再次顯示感染后幾個(gè)月SARS-CoV-2特異性記憶B細(xì)胞的增加~來(lái)自SARS-CoV-2恢復(fù)期供體的10-30%的Spike特異性記憶B細(xì)胞對(duì)RBD結(jié)構(gòu)域具有特異性（圖2A和圖S2B）。
SARS-CoV-2感染后，還檢測(cè)到SARS-CoV 2核衣殼特異性記憶B細(xì)胞（圖2A）。與刺突和RBD特異性記憶B細(xì)胞相似，核衣殼特異性記憶A細(xì)胞頻率在PSO的前4-5個(gè)月穩(wěn)步增加（圖2、G和H，以及圖S2D）。抗體親和力成熟可能解釋抗原探針檢測(cè)到的SARS-CoV-2特異性記憶B細(xì)胞的頻率增加。然而，探針結(jié)合的幾何平均熒光強(qiáng)度（MFI）隨時(shí)間穩(wěn)定（圖S2，I和J），不支持記憶B細(xì)胞頻率增加的親和力成熟解釋。
SARS-CoV-2刺突特異性記憶B細(xì)胞群中Ig同種型的表達(dá)隨時(shí)間而變化（圖2，I至O）。在記憶的最早階段（20-60天PSO），IgM+和IgG+同種型相似（圖2O），但I(xiàn)gM+記憶B細(xì)胞隨后下降（圖2，M至O），然后IgG+刺突特異性記憶B細(xì)胞由6個(gè)月PSO支配（圖2O）。IgA+Spike特異性記憶B細(xì)胞被檢測(cè)為總Spike特異記憶B細(xì)胞的一小部分（約5%，圖2）。IgG+特異性記憶B細(xì)胞頻率增加，而IgA+在8個(gè)月期間較低且穩(wěn)定（圖2，I至L）。在8個(gè)月期間，RBD-和核衣殼特異性記憶B細(xì)胞觀察到IgG+記憶增加、短暫IgM+記憶和穩(wěn)定IgA+記憶的類似模式（圖2，O至Q，圖S2，E至H）。
人類原發(fā)性急性病毒感染后記憶B細(xì)胞動(dòng)力學(xué)的知識(shí)有限。最近發(fā)表的一項(xiàng)SARS-CoV-2研究發(fā)現(xiàn)，RBD特異性記憶B細(xì)胞在約90天的PSO中存活，其頻率增加（IgA+細(xì)胞的頻率較低），與本文報(bào)道的觀察結(jié)果一致。對(duì)于其他急性傳染病，我們目前還不知道通過(guò)流式細(xì)胞術(shù)對(duì)感染后6個(gè)多月窗口的抗原特異性記憶B細(xì)胞進(jìn)行的其他橫截面或縱向分析，除了四名埃博拉患者和兩名黃熱病病毒免疫后研究的患者（我們排除了流感疫苗進(jìn)行比較，因?yàn)槿藗儗?duì)流感有大量接觸和復(fù)雜的免疫史）。在黃熱病研究中，在兩個(gè)個(gè)體中觀察到短暫的IgM+記憶和持久的同種型轉(zhuǎn)換記憶B細(xì)胞。總的來(lái)說(shuō)，根據(jù)這里的觀察，B細(xì)胞對(duì)SARS-CoV-2的記憶發(fā)展是穩(wěn)健的，并且可能是持久的。
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SARS-CoV-2 CD8+記憶T細(xì)胞
使用覆蓋整個(gè)SARS-CoV-2 ORFeome的23個(gè)肽池對(duì)169名新冠感染受試者的SARS-CoV 2記憶CD8+T細(xì)胞進(jìn)行了測(cè)量。最常見(jiàn)的ORF是刺突、膜（M）、核衣殼和ORF3a（CD69+CD137+，圖3A和圖S3，A和B），與我們之前的研究一致。在PSO 1個(gè)月（20-50天）時(shí)，可檢測(cè)到循環(huán)SARS-CoV-2記憶CD8+T細(xì)胞的受試者百分比為70%（40/57，圖3B）。PSO≥6個(gè)月時(shí)SARS-CoV-2記憶CD8+T細(xì)胞陽(yáng)性的受試者比例為50%（18/36）。這可能會(huì)低估CD8+T細(xì)胞的記憶，因?yàn)?5個(gè)mers可能不是檢測(cè)某些抗原特異性CD8+T淋巴細(xì)胞的最佳方法；然而，最佳大小的SARS-CoV-2 I類預(yù)測(cè)表位池也在約70%的1-2個(gè)月PSO個(gè)體中檢測(cè)到病毒特異性CD8+T細(xì)胞，表明兩種實(shí)驗(yàn)方法之間的一致性。
SARS-CoV-2記憶CD8+T細(xì)胞在整個(gè)隊(duì)列中下降了125天的表觀t1/2（圖3B），在29個(gè)配對(duì)樣本中下降了190天（圖3C）。刺突特異性記憶CD8+T細(xì)胞表現(xiàn)出與總體SARS-CoV-2特異性記憶CD8+TT細(xì)胞相似的動(dòng)力學(xué)（完整隊(duì)列的t1/2 225天，配對(duì)樣本的185天，圖3，D和E分別）。表型標(biāo)記表明，大多數(shù)SARS-CoV-2特異性記憶CD8+T細(xì)胞是末端分化的效應(yīng)記憶細(xì)胞（TEMRA），具有少量的中央記憶（TCM）和效應(yīng)記憶（TEM）（圖3，F(xiàn)和G）。在流感的背景下，CD8+TEMRA細(xì)胞與人類預(yù)防嚴(yán)重疾病相關(guān)。此處觀察到的記憶CD8+T細(xì)胞半衰期與黃熱病免疫后觀察到的123天t1/2的記憶CD8+T細(xì)胞半衰期相當(dāng)。因此，SARS-CoV-2特異性CD8+T細(xì)胞的循環(huán)動(dòng)力學(xué)與另一種導(dǎo)致人類急性感染的病毒的報(bào)道一致。
SARS-CoV-2 CD4+記憶T細(xì)胞
使用覆蓋SARS-CoV-2 ORFeome的相同系列的23個(gè)肽池，在169名受試者中鑒定了SARS-CoV-2記憶CD4+T細(xì)胞。最常見(jiàn)的ORF是Spike、M、核衣殼、ORF3a和nsp3（CD137+OX40+，圖4A和圖S4，A和B）。循環(huán)SARS-CoV-2記憶CD4+T細(xì)胞反應(yīng)相當(dāng)穩(wěn)?。▓D4B）；在1個(gè)月PSO時(shí)，42%（24/57）的新冠感染患者的SARS-CoV-2特異性CD4+T細(xì)胞>1.0%。SARS-CoV-2記憶CD4+T細(xì)胞在整個(gè)隊(duì)列中以94天的明顯t1/2下降（圖4B），在36個(gè)配對(duì)樣本中以64天的t1/2（圖4C）。PSO 1個(gè)月（20-50天）時(shí)，可檢測(cè)到循環(huán)SARS-CoV-2記憶CD4+T細(xì)胞的受試者百分比為93%（53/57，圖4B）。PSO≥6個(gè)月時(shí)SARS-CoV-2記憶CD4+T細(xì)胞陽(yáng)性的受試者比例為92%（33/36）。
刺突特異性和M特異性記憶CD4+T細(xì)胞表現(xiàn)出與SARS-CoV-2特異性記憶性CD4+T整體相似的動(dòng)力學(xué)（整個(gè)隊(duì)列t1/2分別為139天和153天。圖4，D和E，以及圖S4D）。在≥6個(gè)月PSO時(shí)存在的多個(gè)SARS-CoV-2記憶CD4+T細(xì)胞具有TCM表型（圖4F）。
濾泡輔助T細(xì)胞（TFH）是B細(xì)胞輔助所需的CD4+T細(xì)胞的特殊亞群，因此在大多數(shù)情況下對(duì)產(chǎn)生中和抗體和長(zhǎng)期體液免疫至關(guān)重要。因此，我們檢測(cè)了循環(huán)TFH（cTFH）記憶CD4+T細(xì)胞，由于對(duì)Spike的抗體反應(yīng)的重要性，特別關(guān)注Spike特異性記憶cTFH細(xì)胞。還使用MP_R巨池測(cè)量了SARS-CoV-2基因組其余部分中預(yù)測(cè)表位的特異性記憶cTFH細(xì)胞。大多數(shù)新冠感染患者在早期檢測(cè)到SARS-CoV-2 Spike和MP_R特異性記憶性cTFH細(xì)胞（16/17）。圖4，H和I，以及圖S5，A至D）。cTFH記憶似乎是穩(wěn)定的，幾乎所有受試者在6個(gè)月PSO時(shí)Spike和MP_R記憶cTFH細(xì)胞呈陽(yáng)性（分別為11/12和10/12。圖4，H和I）。最近激活的cTFH細(xì)胞是PD-1hi。與向靜止記憶性cTFH細(xì)胞的轉(zhuǎn)化一致，PD-1hi SARS-CoV-2特異性記憶性cTFH的百分比隨時(shí)間下降（圖4J）。CCR6+SARS-CoV-2特異性cTFH細(xì)胞與新冠感染疾病嚴(yán)重程度降低相關(guān)，并且在一些研究中被報(bào)告為Spike-specific cTFH的主要組成部分。在這里，我們證實(shí)了Spike特異性和MP_R記憶性cTFH細(xì)胞的顯著部分是CCR6+。我們還觀察到CCR6+cTFH記憶隨著時(shí)間的推移而增加（與大塊cTFH相比，PSO≥6個(gè)月時(shí)p=0.001和p=0.014。圖4K）?？傮w而言，SARS-CoV-2感染后觀察到大量的cTFH記憶，持續(xù)時(shí)間≥6個(gè)月PSO。
免疫記憶關(guān)系
考慮了SARS-CoV-2的免疫記憶，包括免疫記憶區(qū)之間的關(guān)系。男性的刺突IgG（ANCOVA p=0.00018，圖5A）、RBD和核衣殼IgG（ANCOVA p=0.00077，p=0.018，圖S6，A和B）較高，與其他研究一致。當(dāng)僅考慮非住院病例時(shí)，男性中也觀察到較高的峰值IgG（ANCOVA p=0.00025，圖S6C）。相反，男性和女性之間的IgA或PSV中和滴度沒(méi)有觀察到差異（圖S6，D至F），SARS-CoV-2記憶B細(xì)胞、記憶CD8+T細(xì)胞或記憶CD4+T細(xì)胞頻率也沒(méi)有檢測(cè)到差異（見(jiàn)圖S6，G至K）。
免疫記憶檢測(cè)記憶量和新冠感染疾病嚴(yán)重程度之間的關(guān)系。此前住院的新冠感染病例數(shù)量（n=13）限制了分析選項(xiàng)。然而，病例在男性和女性之間分布良好（表1），大量非住院病例的數(shù)據(jù)可供比較，圖1至圖3中的分析to44表明，在分析的時(shí)間窗內(nèi)，免疫記憶相對(duì)穩(wěn)定。因此，我們可以通過(guò)對(duì)來(lái)自120天以上PSO的所有樣本進(jìn)行分組來(lái)簡(jiǎn)化疾病嚴(yán)重性分析[也將數(shù)據(jù)限制為每個(gè)受試者的單個(gè)樣本（圖S7-S9）；之前住院的大多數(shù)受試者在兩個(gè)時(shí)間點(diǎn)進(jìn)行采樣。圖S7A]，然后比較非住院和住院受試者。住院病例中的峰值和RBD IgG滴度高于非住院病例（圖5B），與其他研究一致。住院患者的尖峰和RBD特異性記憶B細(xì)胞頻率也較高（分別為1.7倍和2.5倍。圖5C和圖S8）。相反，與非住院病例相比，住院病例中記憶性CD8+T細(xì)胞頻率并不高（圖5D和圖S9），住院病例與非住院患者相比記憶性CD4+T細(xì)胞的頻率呈下降趨勢(shì)（圖5E和圖S9）。因此，盡管結(jié)論受到住院受試者數(shù)量的限制，但三項(xiàng)獨(dú)立研究中Spike IgG滴度的增加是一致的，并且在住院病例中觀察到記憶B細(xì)胞的增加（其他研究中未測(cè)量），表明經(jīng)歷更嚴(yán)重新冠感染病程的個(gè)體對(duì)SARS-CoV-2的長(zhǎng)期體液免疫的兩個(gè)亞群都較高。T細(xì)胞記憶并沒(méi)有遵循相同的模式，這與新冠感染住院病例急性期T細(xì)胞反應(yīng)較差的跡象一致。此外，這些數(shù)據(jù)表明，雖然性別和新冠感染疾病嚴(yán)重程度導(dǎo)致SARS-CoV-2免疫記憶的差異，但這兩個(gè)因素都不能解釋該病毒免疫記憶的大部分異質(zhì)性。
很少有發(fā)表的數(shù)據(jù)集將抗原特異性抗體、B細(xì)胞、CD8+T細(xì)胞和CD4+T細(xì)胞記憶與相同個(gè)體的急性病毒感染進(jìn)行比較。因此，我們利用這一組合數(shù)據(jù)集來(lái)檢查免疫記憶分區(qū)之間的相互關(guān)系。我們重點(diǎn)研究了RBD IgG、RBD記憶B細(xì)胞、刺突IgA、SARS-CoV-2特異性CD8+T細(xì)胞和SARS-CoV 2特異性CD4+T細(xì)胞，因?yàn)樗鼈冊(cè)诒Ｗo(hù)性免疫中的潛在作用。大多數(shù)（64%）新冠感染病例在1至2個(gè)月PSO時(shí)，所有五個(gè)免疫記憶分區(qū)均呈陽(yáng)性（圖5、F和G），不完全反應(yīng)主要反映了沒(méi)有檢測(cè)到CD8+T細(xì)胞記憶和/或IgA反應(yīng)差的個(gè)體（圖5G）。新冠感染疫情爆發(fā)后5到8個(gè)月，所有五個(gè)免疫記憶分區(qū)陽(yáng)性的個(gè)體比例下降到43%；盡管如此，95%的個(gè)體對(duì)五種SARS-CoV-2免疫記憶反應(yīng)中的至少三種仍呈陽(yáng)性（圖5G）。5至8個(gè)月時(shí)的免疫記憶PSO代表了不同個(gè)體中不同免疫記憶區(qū)的貢獻(xiàn)（圖5G）。如果用中和抗體代替RBD IgG，則獲得了類似的結(jié)果（圖S10A）?？傊?，這些發(fā)現(xiàn)再次突出了免疫記憶的異質(zhì)性，不同個(gè)體的免疫記憶模式不同。
接下來(lái)，通過(guò)評(píng)估免疫記憶區(qū)隨時(shí)間的比率來(lái)檢查記憶成分之間的相互關(guān)系。SARS-CoV-2 CD4+T細(xì)胞記憶與SARS-CoV-2 CD8+T細(xì)胞存儲(chǔ)的比率隨著時(shí)間的推移基本穩(wěn)定（圖5H和圖S10B）。鑒于血清學(xué)測(cè)量是在人群規(guī)模上對(duì)免疫記憶的最簡(jiǎn)單的測(cè)量，我們研究了隨著時(shí)間的推移，這些血清學(xué)測(cè)量可以作為SARS-CoV-2免疫記憶其他成分的替代標(biāo)記。循環(huán)RBD IgG和RBD特異性記憶B細(xì)胞之間的關(guān)系在研究的時(shí)間范圍內(nèi)變化了約20倍（R=0.60，圖5H和圖S10C）。循環(huán)Spike IgA和RBD特異性記憶B細(xì)胞之間的變化關(guān)系甚至更大（R=0.55，圖5H和圖S10D）。RBD IgG和SARS-CoV-2 CD4+T細(xì)胞記憶之間的關(guān)系在研究的時(shí)間范圍內(nèi)相對(duì)平坦（圖5H）；然而，變化跨越了約1000倍的范圍（圖S10E）。因此，由于個(gè)體之間的異質(zhì)性，循環(huán)RBD IgG評(píng)估T細(xì)胞記憶的預(yù)測(cè)能力較差（R=0.046）?？傊?，雖然免疫反應(yīng)的異質(zhì)性是新冠感染的一個(gè)決定性特征，但幾乎所有受試者都對(duì)SARS-CoV-2產(chǎn)生免疫記憶。
英文原文
Dan JM, Mateus J, Kato Y, et al. Immunological memory to SARS-CoV-2 assessed for up to 8 months after infection. Science. 2021.
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